1.用接種環挑取各試管斜面的菌種于帶玻璃珠的無菌水中，用手振蕩數分鐘使弛子分散，過濾后制成混合孑包子懸液。
2.用無菌吸管(或針筒）向各培養皿中注入一定濃度的混合孑包子懸浮液0.5毫升。
3.向各培養皿內注入15Ml~20ml的熔化狀瓊脂培養基（約45C），將菌液與培養基混合均勻，待其冷卻。
4.用鑲子將圓片濾紙在不同濃度的防霉劑中浸漬片刻，取出置于帶菌培養基平板的中央，蓋上蓋子。
5.置適宜溫度下，培養2~3d，觀察濾紙片圓片周圍抑菌圈的有無及大小。 

抑菌圈法是衡量殺菌防霉劑效果的一種方式，主要用于測定殺菌防霉劑對細菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用，是定性或半定量的方法。通過殺菌防霉劑在瓊脂平板上的擴散能力來初步篩選更有效的殺菌防霉劑品種。健明迪檢測開展抑菌圈檢測服務。

由于濾紙圓片所吸附的藥液慢慢向四周擴散，因此在濾紙片的周圍就出現清晰的抑菌圈（加入該防霉劑對供試菌有抑制效果）。抑菌圈的大小代表藥劑抗菌力的高低。在一定的藥劑濃度范圍內， 藥劑的濃度越高則抑菌圈的直徑越大。此法同樣適合于測定單個菌的抗菌效果。